未出现阳性信号是抗体相关实验的常见问题，常出现的有WB实验曝光后膜上一片空白等现象，需要根据具体的情况进行分析：

一、确认检测靶点在样本中的表达情况

       一般来说，常见的蛋白可以在基因注释查询网站——BioGPS中进行查询。但应注意，该网站罗列的是基因对应编码蛋白在转录水平上的表达量。该表达量会与实际翻译产生的蛋白水平会有出入，仅能作为参考。低表达量的蛋白，在能检测到的情况下，可以提高抗体的稀释浓度来改善。

       分泌型蛋白在细胞的正常表达中，会分泌到细胞外，胞内残留的蛋白含量比较少，这种时候，建议用含有蛋白的阳性样本（比如组织）作为对照进行比对，判断是蛋白含量低还是抗体特异性的问题。

磷酸化蛋白，以及一部分蛋白，需要进行药物的刺激，才能在样本中高表达，这种情况下，一般客户可能没有阳性样本，需要客户提供参考文献作为说明，我们根据参考文献中的具体报道，进行问题的判明。有时候，客户会忽视文献中样本的处理步骤，导致反馈的产生。

  二抗，又名“secondary antibody”,常出现在需要使用一抗的免疫实验中。

    按照功能可分为常规标记二抗和荧光二抗两种。二抗的结合对象为一抗，其以一抗本身 （如兔IgG）为靶标，通常在产品名称中用类似“Goat Anti-Rabbit（即山羊抗兔）”来标识靶标识别关系。以“Goat Anti-Rabbit（即山羊抗兔）”为例，“Goat-山羊”为二抗的抗体来源种属（即“宿主”），“Rabbit-兔”为二抗所要结合的一抗的抗体来源种属。

    当某一免疫反应体系中的一抗来源为“Mouse-小鼠”时，即可选用“Goat Anti-Mouse”或“Rabbit Anti-Mouse”等二抗来完成反应。

    二抗与一抗的抗体来源种属，应保持不同，以避免抗体内自相反应。

具体储存建议以产品说明书及产品标签为准。

1.一般情况下,浓缩抗体可以在2-8°C条件下储存12周

2.为延长抗体使用期限,建议客户收到抗体后立即冻存于-20°C冰箱(50%甘油的凝固点为-24°C

3.长期储存,建议将抗体分装保存在温度设置更低的冰箱中(分裝目的是为了减少反复冻融对抗体活性的损害,同时避免多次从同-管中吸取抗体造成污染)。