LD-Mini01四块胶迷你垂直电泳槽

产品简介

LD-Mini01四块胶迷你垂直电泳槽可以运行预制胶和手工灌制的凝胶，最多可容纳4块凝胶同时运行；兼容1-D和2-D电泳应用。LD-Mini01四块胶迷你垂直电泳槽带有制胶架和带固定边条的玻璃板，使得手工灌制凝胶变得简便，并防止漏胶。

产品特点

1. 可容纳1-4块凝胶，灵活使用。可在1小时内完成4块小型胶的电泳。

2. 可容纳不同体积的缓冲液：2块胶缓冲液体积为700 mL，1块胶缓冲液体积为1000 mL。

3. 典型 SDS-PAGE 电泳时间： 35-45分钟（200V 恒压）。

4. 封边垫条永久固定在玻璃板上，确保精确对齐，防止漏胶。

5. 特殊材料电泳梳，避免抑制凝胶聚合反应，内置脊设计避免空气接触。

6. 平行排列的灌胶架，可同时观察两块凝胶的灌制过程，配合弹簧杆和橡胶垫，提供良好的密封性。

7. 带有凸轮的制胶框，确保凝胶制备时的精确对齐。

LD-Mini01垂直电泳槽配件均可单独购买，详情如下表所示：（备注：产品目录价不满200元需收运费）

技术规格

外形尺寸：16cm(L)x12cm(W)x18cm(H)

预制胶兼容性：ReadyGel precast gels

电压限制：600V DC and 30W

重量（含包装）：2.0 kg

制胶架：聚碳酸酯（Polycarbonate）

销钉、固定环与弹簧：不锈钢（Stainless steel）

灌胶框：聚碳酸酯（Polycarbonate）+玻纤

灰色胶垫：硅橡胶（Silicon rubber）

电极芯：聚碳酸酯（Polycarbonate）+玻纤

U型密封垫：绿色硅橡胶（Silicon rubber）

缓冲液槽与上盖：聚碳酸酯（Polycarbonate）

电泳梳子：聚碳酸酯（Polycarbonate）

LD-Mini01四块胶迷你垂直电泳槽可以运行预制胶和手工灌制的凝胶，最多可容纳4块凝胶同时运行；兼容1-D和2-D电泳应用。

1、凝胶板准备

（1）手工灌制凝胶

玻璃板夹和制胶架装配：

注意：所有玻璃板必须为洁净、干燥的。

①将灌胶框垂直放置在水平桌面上，并使灌胶框门处于开放状态。

②按照所需凝胶厚度选择带边条的玻璃板，将短玻璃板放置其上（见图3a）。

③使带边条玻璃板的标记端向上，将两块玻璃板滑入灌胶框，使短玻板一面朝 向前方（见图3b）。

注意：确认两块玻璃板平齐处于水平平面上，并且标记方向正确。玻璃板方向错 误或者未 对齐会造成漏胶。

④玻璃板到位后关合灌胶框们，将玻璃板夹夹紧在灌胶框中（见图3c）。检查玻璃板底部 是否平齐。

⑤保持灌胶框门朝外，将灌胶框放置于制胶架的灰色灌胶胶垫上。同时将弹簧 杠杆压在带 边条的玻璃板上（见图3d）。

图3：组装灌胶框和制胶架

（2）灌胶

不连续聚丙烯酰胺凝胶：

①将梳子完全放入组合好的凝胶夹中，在梳齿下端1厘米处作标记。此标记为分离胶高度。

②混合除APS及TEMED外的所有试剂来制作分离胶单体溶液（参见第四章的凝胶列表）。真空脱气15分钟以上。

③在脱气后的单体溶液中加入APS和TEMED，用移液管或加样枪将溶液注入玻璃板之间至标记处。注入溶液时须平稳以防止其与空气混合。

④立即以水或者叔戊醇（2-甲基2-丁醇）覆盖溶液表面。

注意：如果用水覆盖须小心缓慢平稳加入以防与溶液混合。

⑤放置45分钟到1小时使凝胶聚合。以双蒸水彻底清洗凝胶表面。不要让醇类物质在胶上超过1小时以防止上部凝胶脱水。

注意：此分离胶可在室温下储存过夜。加入5毫升1:4稀释的1.5MTri-HCl，PH 8.8缓冲液（Laemmli system）以防止分离胶干燥。如果用其它缓冲体系，加入5毫升1倍稀释的分离胶缓冲液储存。

⑥准备浓缩胶单体溶液。混合除APS和TEMED外的所有试剂，真空下脱气15分钟以上。

⑦注入浓缩胶溶液前用滤纸使分离胶表面干燥。

⑧在脱气后的浓缩胶单体溶液中加入APS和TEMED并将溶液注入玻璃板之间直至与短玻璃板平齐。

⑨在边条之间从上部插入所需的梳子，确认梳子两端突起在边条之间引导。完全插入直至梳子背脊与短玻璃板对齐。

⑩放置30-45分钟使浓缩胶聚合。

⑪轻轻取出梳子并以蒸馏水或缓冲液彻底清洗凝胶表面。

⑫以蒸馏水，去离子水清洗用过的夹胶框和制胶架。

连续聚丙烯酰胺凝胶：

①混合除APS及TEMED外的所有试剂来制作凝胶单体溶液（参见第四章的凝胶列表）。真空脱气15分钟以上。

②在脱气后的单体溶液中加入APS和TEMED，将溶液注入玻璃板之间直至与短玻璃板平齐。

③在边条之间从上部插入所需的梳子，确认梳子两端突起在边条之间引导。完全插入直至梳子背脊与短玻璃板对齐。

④放置45分钟到1小时使凝胶聚合。

⑤轻轻取出梳子并以蒸馏水或缓冲液彻底清洗凝胶表面。

⑥以蒸馏水，去离子水清洗用过的夹胶框和制胶架。

2、电泳模块组装与上样

所需材料：

洁净干燥的LD-Mini01电泳缓冲液槽；

电泳模块（电极芯模块只能用于1或2块胶，3或4块胶需要共用组件模块）；

运行缓冲液（1-2块胶700毫升；3-4块胶1000毫升）。

（1）组装

注：只运行2块胶时使用电极芯（有电极插头）而非共用组件（没有电极插头）。运行4块胶时，电极芯和共用组件均要使用，每个组件2块胶。

①将夹胶框呈打开方式放置于干净平整桌面上（见图4a）。

②将第一块凝胶三明治板以短玻璃板向内方式放置于凝胶支撑架上，凝胶支撑架模铸于组件底部且每侧均有两个。此时凝胶板相对中心有30度的夹角。放置第一块胶时须小心确认夹胶框保持平衡状态不会翻倒。在另一侧的凝胶支撑架上放置第二块胶。此时共有两块胶每侧一块相对中心倾斜（见图4b）。

图4：组装电泳槽的电泳模块

注：凝胶板必须以平玻璃板向内方式放置于夹胶框两侧。同时，夹胶框需要2块胶板组合形成功能组件。如果运行奇数胶（1或3块胶），则须使用单胶替代板（见图4b）。

③用一只手轻轻将2块胶板推向中心靠紧红色胶条，确保平玻璃板正在红色胶垫上端的凹槽之下。

④一只手压紧胶板，另一只手将绿色色夹胶框夹合拢在胶板上，使其锁定到位。或者用双手持定整个组件并稳定住胶板，同时合拢两侧的夹胶框夹使其锁定到位（见图4c）。

夹胶框夹会推动胶板使平玻璃板与红色胶垫的凹槽对紧防止漏液（请确认平玻璃板正在红色胶垫上端的凹槽之下）。此时可以用缓冲液清洗样品孔和上样了（见图4d）。

注：如果运行超过2块胶，请在共用组件上重复a-d的操作。

重要提示：请不要尝试在胶板没有被确认正在红色胶垫上端的凹槽之下时合拢夹胶框夹。为防止胶板在锁定过程中移动，请用一只手稳固均匀地将其加紧在夹胶框两侧。

注意：运行1-2块胶时请不要把蘑菇头电泳芯放入电泳仪中，那样做会产生额外的热，影响电泳分离效果。

（2）上样

①向组件（上极槽）中注入缓冲液直至外玻璃板上沿之下。

②当电泳模块尚在桌面上未被放入缓冲液槽中时上样。

③使用注射器或加样枪将样品加入样品孔中。

注：加样时应缓慢使样品均匀沉降于样品孔底部。注意不要用针头或加样器头刺破胶孔底部。

注：加样可以在模块被放入电泳槽之前或之后进行。两种方法均可以得到满意的结果。两种情况下组件模块（上极槽）和缓冲液槽（下极槽）均须按描述的注入缓冲液。

（3）在缓冲液槽中放置电泳芯模块

注：所需缓冲液体积：2块胶700毫升；4块胶1000毫升。

缓冲液槽具有两个位置可放置两个模块：电极芯模块在后，共用组件在前。

①首先把缓冲液槽放置于平整桌面上，使正面（具有2-Gels和4-Gels标记的那一面）朝前。如果方向正确，槽边缘的红色标记应该在右边，黑色标记在左边。

②如果只运行2块胶则只需用带插头电泳芯，将其放在后部位置上使得红色（+）极与槽右侧的红色标记相对应。

③如需做4块胶。除放入电极芯模块（如上所述）外，还要将共用组件模块（无电极插头）放入前部位置。确认两者的红色（+）电极与槽中右侧的红色标记相对应。注意，位置和方向的错误会使上盖无法盖合。

④在缓冲液槽（下极槽）中加入缓冲液至标记位置。（2块胶需550毫升；4块胶需680毫升）。

（4）缓冲液槽装配

将上盖盖在缓冲液槽上。确认颜色标记的插头与插座相对应。插头、插座的匹配可以使定位准确。上盖上的障碍物可以防止定位错误。注意，缓冲液槽两侧的突出部分应该从上盖的狭缝中穿出，以保证上盖的正确闭合。此时用拇指已持续力按压上盖，直到压紧在缓冲液槽上。

注意：运行1-2块胶时请不要把共用组件放入电泳槽中。那样做会产生额外的热，影响电泳分离效果。

（5）电源条件

①将电源插头认准正负极插入电泳仪电源插孔内。

②给电泳槽通电开始电泳。恒压200V是SDS-PAGE和多数native PAGE电泳的推荐条件，同样的 200V条件可以被用于2块胶和4块胶上。用户针对不同的应用优化的电压条件会不同。在200V电压条件下运行SDS-PAGE大约需要35分钟。

（6）凝胶取出

①电泳完成后关断电源、拔出电源插头。

②移开上盖，小心取出电极组件，倒出电泳缓冲液。

注：为防止缓冲液漏洒，请在打开夹子前倒掉缓冲液。

③打开夹子，取出凝胶板。

④轻轻分离两块玻璃板，从凝胶板中取出凝胶。

⑤采用胶面向下，将胶与玻璃板浸泡在固定或转移缓冲液中的办法使凝胶与玻璃板分离。

⑥用后以蒸馏去离子水清洗LD-Mini01电泳槽的电极芯、夹胶框和缓冲液槽。