适用于蛋白转印实验,产热量小,30min内不需要冰浴,可以在400mA的电流下快速转膜,适用于湿法转膜
适用于蛋白转印实验,产热量小,30min内不需要冰浴,可以在400mA的电流下快速转膜,适用于湿法转膜
产品简介
1. 本产品是一种安全无害的用于 Western Blot 时湿转快速转膜的缓冲液,能高效快速地将蛋白转移到印迹膜上;可以使用甲醇或者乙醇,能在 15-30 min 内完成转膜过程。
2. 安全无毒害:本产品不含有毒有害组分。
3. 转膜缓冲液的转膜效果与传统转膜缓冲液一致或更优。
4. 转膜快速 、无需冰浴:使用快速转膜缓冲液时,在 400 mA 恒流转膜 15-30 min 即可将聚丙烯酰胺凝 胶上的蛋白转移至 PVDF 膜或硝酸纤维膜( NC 膜)等印迹膜上,并且产热较传统转膜缓冲液更低。
储存与运输
常温运输与储存,24个月有效期。
适用于蛋白转印实验,产热量小,30min内不需要冰浴,可以在400mA的电流下快速转膜,适用于湿法转膜
注意事项
1. 本产品适用于 Tris-glycine 、Bis-Tris 等体系蛋白凝胶的湿法转膜。
2. PVDF 膜使用前需用无水乙醇或甲醇浸润 30 s 左右。
3. 30 min 内的转膜无需冰浴,超过 30 min 的转膜建议冰浴。
4. 由于用于转膜的电源品牌和型号的不同,一方面最高电流差异较大,另一方面功率也会有加大差别;部分电源设定恒流为400 mA 时 ,会超过最大功率出现过载保护,此时需适当调低电流,或者选用功 率更大的电源。
5. 转膜时转膜缓冲液的温度 、凝胶的参数(如厚度 、丙烯酰胺浓度 、离子浓度)、滤纸厚度 、转膜缓冲 液的体积、转膜缓冲液的使用次数都可能会影响电流和电压;如出现过载的情况请适当降低电流并延 长转膜时间。
6. 本产品正常颜色为无色透明,如出现浅棕色或者黄褐色,应该及时丢弃
使用说明
操作步骤
1. 每袋免冰浴快速转膜缓冲液干粉溶解于 600 mL 纯水中,加入 200 mL 无水乙醇或甲醇,充分溶解混匀 ,然后加水定容至 1000 mL(根据需求适当成倍配制);
2. 做好转印所需的三明治结构,从负极(黑色面)到正极(红色面)顺序为海绵、滤纸、凝胶、印迹膜、滤纸、海绵,然后转移至转印槽中,设定恒流400 mA,转膜时间15-30 min(此条件针对1.0 mm厚的凝胶,如凝胶厚度为0.75 mm,适当减少转膜时间;如凝胶厚度为1.5mm,适当延长转膜时间)完成蛋白转膜。
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免冰浴快速转膜缓冲液 |
恒流 |
分子量大小 |
推荐转膜时间 |
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300 mA |
20 k Da 以下 |
20 分钟 |
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20-100 k Da |
30 分钟 |
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100-150 k Da |
50 分钟 |
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150 k Da 以上 |
60 分钟以上 |
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400 mA |
20 k Da 以下 |
15 分钟 |
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20-100 k Da |
25 分钟 |
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100-150 k Da |
45 分钟 |
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150 k Da 以上 |
55 分钟以上 |